細胞培養室如何有效避免微生物交叉污染？ | 細胞房消毒是一項非常重要的任務，因為它可以預防細胞培養中的污染和交叉感染。細胞培養中常見的生物污染包括細菌芽孢霉菌支原體噬菌體污染等。對實驗室進行定期清潔、使用高效型消毒劑是避免細胞培養過程中由于實驗室環境引起細胞污染的主要措施
對于細胞培養，污染是最大的敵人，不管是設備、試劑亦或是環境造成的污染，這是每個養細胞的同志所頭疼的事情，我們先識別下污染的分類：
細菌芽孢污染
培養細胞受細菌污染后，會出現培養液變混濁，pH改變。污染后細胞發生病理改變，生長不良、胞內顆粒增多、增粗，最后變圓脫落死亡。以白色葡萄球菌較為常見。
真菌污染
培養細胞受真菌污染后，可見培養液中漂浮著白色或淺黃色的小點，有的散在生長，培養液一般不發生混濁；倒置顯微鏡下可見絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養基中，有的呈鏈狀排列。真菌污染后，細胞生長變慢，但最后由于營養耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。
支原體污染
支原體是沒有細胞核結構的原核生物，多吸附于細胞表面或散在于細胞之間，可抑制細胞的代謝和成長，改變核酸合成、影響細胞的抗原性、導致染色體改變等。培養細胞受支原體污染后，由于支原體生長緩慢，開始不易發現。部分敏感細胞可見細胞生長增殖變慢，多數細胞污染后無明顯變化。若不及時處理，會產生交叉污染，又因常規培養基中預防細菌和霉菌的抗生素對它沒有作用，因此防治支原體的污染非常重要。
噬菌體污
噬菌體是一種寄生于細菌上的病毒，可以感染并破壞細菌。噬菌體污染會對實驗結果產生影響，影響實驗的可重復性和準確性。此外，噬菌體污染還可能導致實驗結果的誤解和實驗人員的健康威脅。
二細胞培養過程中環境污染途徑
1，取放細胞時引起的污染
細胞培養過程中，取放細胞是最基本的操作，培養房開關門的瞬間，環境中的微生物或多或少會進入培養箱中，而且內外溫差導致內門冷凝水的產生，極易吸附微生物，都是造成培養箱污染的風險因素。
2，滅菌不到位造成的二次污染
細胞培養過程中，因其它操作問題（如培養基潑灑，水盤污染等），造成培養房的大規模污染也時常會發生，此時就需要對培養箱進行滅菌消毒，常規的消毒（如紫外照射）只能達到表面消毒的效果，特別是對真菌等頑固性污染，無法進行有效滅菌，導致后續培養過程中細胞污染頻發。
三傳統消毒方式
在傳統的細胞房消毒方法中，常用紫外線、高溫、酒精等消毒方式。
01、紫外線消毒
紫外線消毒是通過紫外線殺死或去除微生物。
優勢：適合無遮擋敞開型環境和空氣消毒，能夠在短時間內達到殺菌效果。使用成本相對較低，由于不投加化學藥劑，不會對水和環境產生影響。
缺點：殺菌效力較低，無法殺滅霉菌（孢子）、芽孢等高抗性微生物。一些被紫外線照射失活的細菌可形成“光復活"，另外一些細菌可能存在著“暗復活"現象。紫外線燈套容易結垢，需頻繁清洗以維持效果，另外紫外線存在老化問題，要求現場操作人員具備較高技術工藝，及時測定衰減程度并進行校正或更換，無法達到可控、可計量的消毒標準。紫外線不能直接照射人體，所以只能在無人情況下使用。受空間環境因素制約，所以通常作為一種輔助性消毒措施。
02、高溫消毒
高溫消毒是通過高溫殺死或去除微生物。高溫消毒有很多優點，例如能夠殺死微生物的內部、不會產生化學殘留物等。但是，高溫消毒也有一些缺點。首先，高溫消毒需要使用高溫設備，這會增加成本。其次，高溫消毒需要一定的時間，因此需要進行計劃和安排。最后，高溫消毒可能會對一些細胞培養物造成損傷。
03、酒精擦拭消毒
酒精擦拭消毒是常見的一種消毒方法，但酒精易揮發，不穩定。只能用于物體表面消毒，其消毒主要針對普通細菌，對高抗性的芽孢、霉菌等無效。
70%-75%乙醇優勢是對細菌具有較好的殺滅作用，但對真菌的效力有限，可以使用奧克泰士來解決乙醇無法較好解決的酵母、霉菌、芽孢的污染問題。
對于細胞培養實驗室來說，最重要的是杜絕一切可能的污染源。
四如何有效避免污染
1.重視細胞房管理工作，規范操作
定期進行細胞房清潔消毒工作，規范實驗人員操作（如身著白大褂、換鞋等），創造潔凈培養環境。
2.避免頻繁查看細胞
做好實驗規劃，減少培養箱門開關的頻率，取放細胞時需佩戴潔凈的手套，并用少量的 70% 醫用酒精（過多會導致培養箱中殘留乙醇蒸汽）擦拭培養瓶/皿表面，從而降低細胞培養箱污染的風險；
3.定期維護和滅菌，預防污染
定期清潔維護，培養箱內用水滅菌后使用并定期更換，選擇培養箱時，可優先考慮有自動滅菌功能的培養箱。細胞房一旦發生污染，及時進行消毒滅菌工作。
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