細胞污染小知識
Oxytech
細胞作為重要的實驗模型廣泛應用于各類生物實驗, 幾乎所有科研實驗室中都需進行細胞培養。細胞培養過程中最大的威脅就是細胞污染, 凡是混入細胞培養環境中, 對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為污染。細胞一旦遭到污染,所有的實驗結果都會變得毫無意義。因此, 及時檢測并鑒定出所培養的細胞是否被污染至關重要。微生物污染是細胞培養中的一個主要問題，但是可以采用一系列程序來防止或消除污染。對實驗室進行定期清潔、使用高效型消毒劑是避免細胞培養過程中由于實驗室環境引起細胞污染的主要措施。
細胞培養主要常見污染
細胞培養污染主要分為兩類，一是化學污染物，例如：培養基、血清和水中的雜質、內毒素、增塑劑和去污劑。
二是生物污染物，例如：細菌、霉菌、酵母、病毒、支原體、原蟲以及其他細胞系的交叉污染。
那么究竟微生物造成細胞污染我們又該如何應對？
一、微生物污染分類
01
細菌污染
細菌污染是細胞培養中最常見的污染，其污染主要來源于實驗室環境、實驗人員（實驗服）、實驗用具等，甚至在細胞培養過程中添加抗菌素（一般為預防劑量），也可能因為操作不慎而引起污染。
種類：造成細菌感染最常見的有革蘭氏陽性菌如枯草桿菌、葡萄球菌等；大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌也會造成細菌感染。
解決方法：
日常清潔時，在工作前和工作期間，對于細菌污染，特別是在發生任何潑濺后，應使用70%-75%的乙醇擦拭工作臺面。
02
真菌污染
真菌污染是細胞培養過程中最常見的另一種污染，尤其在霉雨季節，霉菌污染尤為嚴重。另外由于真菌可以通過孢子繁殖，因此一旦污染很容易發生擴散。
種類：常見的真菌感染有煙曲霉菌、黑曲霉菌、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌污染等。
解決辦法：
對于真菌污染，酒精對真菌的效力有限，可以使用奧克泰士即用型殺孢子劑來解決乙醇無法較好解決的酵母、霉菌、芽孢的污染問題。
03
支原體污染
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間，并獨立生活的原核微生物，廣泛存在于人和動物體內。
種類：細胞培養中常見的支原體有口腔支原體、精氨酸支原體、萊氏無膽甾原體、豬鼻支原體、肺炎支原體和發酵支原體，其中前四者占據支原體污染的絕大比例。
支原體污染具有隱蔽性，他們可以與細胞長期共存，培養基一般不渾濁。大部分細胞被污染后似乎無明顯變化，但其實支原體會抑制細胞生長，并且導致染色體畸變等，對細胞培養實驗影響巨大。
解決方法：
可以使用過氧化氫銀離子溶液，從源頭遏制支原體污染，科學-精準消毒，生態無毒無殘留同時呵護實驗人員的職業健康，可以放心使用！
04
黑膠蟲污染
黑膠蟲是一種生物還是非生物，學術界至今還有爭議。這里我們暫且將其認作是一種微生物。黑膠蟲污染主要來源于血清。
特點：黑膠蟲污染起初對細胞并無影響，當達到一定數量時則會影響細胞生長。受黑膠蟲污染的細胞液通常清亮無變化，在高倍顯微鏡下可以觀察到點狀片狀的游動小體，做布朗運動。
05
原蟲污染
原蟲：培養液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養。這種共生是非常普遍的，但他們的數量小，細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環。
06
病毒污染
病毒作為一種比支原體更小的微生物，體型在nm級，很難用常規方法檢測到。病毒污染分為外源性和內源性，污染主要來源為細胞系，常見于雜交瘤細胞。
特點：病毒污染的細胞液通常清亮無變化，大部分被污染的細胞也不會產生形態及病理現象，小部分病毒會造成細胞變圓、腫脹、脫落。
病毒污染可用血細胞吸附實驗、免疫熒光抗體法以及電子顯微鏡法檢測，但其清除是十分困難的，一旦不幸被污染，建議直接重新引入高質量細胞株。
總結：
Oxytech
第一步：使用前后，應對工作臺面進行消毒，并定期清潔周圍區域和設備。
第二步：日常清潔時，在工作前和工作期間，特別是在發生任何潑濺后，應使用70%乙醇擦拭工作臺面。（70%-75%乙醇優勢是對細菌具有較好的殺滅作用，但對真菌的效力有限，可以使用奧克泰士來解決乙醇無法較好解決的酵母、霉菌、芽孢的污染問題。）
第三步：細胞房環境要做全面的消殺，以及人員手部等防止二次污染！！
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